熒光PCR凍干之二糖

二糖又名雙糖, 雙糖是碳水化合物的一種。它是由兩個(gè)單糖分子經(jīng)縮合反應(yīng)除去一個(gè)水分子而成的糖。例如乳糖由葡萄糖和半乳糖組成，蔗糖由葡萄糖和果糖組成，麥芽糖由兩個(gè)葡萄糖組成等。二糖作為常用的凍干保護(hù)劑，能夠有效增加蛋白凍干穩(wěn)定性，但是用它們作保護(hù)劑得到的無(wú)定形蛋白凍干固體具有較低的Tg，對(duì)儲(chǔ)存過(guò)程中的高溫和高濕條件耐受較差。大分子量糖能夠增加凍干后固體的Tg，增加凍干后穩(wěn)定性，但是對(duì)于低濃度蛋白活性保護(hù)作用不理想。例如蔗糖對(duì)蛋白質(zhì)具有保護(hù)作用，葡聚糖在冷凍和干燥過(guò)程中不能防止蛋白質(zhì)變性，而蔗糖與葡聚糖的混合物則大大提高了在冷凍干燥及儲(chǔ)存過(guò)程中蛋白質(zhì)的保護(hù)作用。盡管葡聚糖不能單獨(dú)作為蛋白質(zhì)的保護(hù)劑，但它具有高Tg，并能提高凍干蛋白質(zhì)的儲(chǔ)藏質(zhì)量，因此和蔗糖等其它保護(hù)劑混合使用可以防止蛋白質(zhì)的損傷，提高產(chǎn)品的質(zhì)量。糖對(duì)蛋白質(zhì)的保護(hù)作用的大小和其濃度有關(guān)，通常在某個(gè)濃度范圍內(nèi)，糖的保護(hù)作用隨著濃度的升高而增大，達(dá)到某一濃度時(shí)，保護(hù)作用達(dá)到大值。這時(shí)在增大糖的濃度，保護(hù)作用不會(huì)明顯增加，有時(shí)反而會(huì)降低。海藻糖作為熒光PCR凍干保護(hù)劑的其中一種，既能在冷凍過(guò)程中充當(dāng)?shù)蜏乇Ｗo(hù)劑，又能在干燥脫水過(guò)程中起到脫水保護(hù)劑的作用。由凍干保護(hù)劑制備得到的熒光PCR凍干制劑可長(zhǎng)期常溫保存，且復(fù)溶速度快。